斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶I基因的克隆与表达

• 作者: 刘韫滔 罗泽宇 胡忠 邱玉峰 韩学凤 龙敏南
• 来源期刊: 微生物学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜卧青霉L-06 内切葡聚糖酶Ⅰ 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 污染环境生物修复
• 页码范围: 696-701
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并实现其在大肠杆菌内的高效表达.[方法]利用RT-PCR技术克隆了斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并将egI基因克隆到原核表达载体中,构建了重组质粒pET32a-egI.[结果]转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明:重组表达产物的相对分子质量约为80 kD,与预期相符.重组表达的菌悬液,经破碎离心,取其上清液,进行纤维素酶活性染色,获得了活性条带.DNS法测得内切酶活力为2.56 IU/mL.[结论]构建了斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶Ⅰ的原核表达系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙敏南	厦门大学能源研究院	64	771	14.0	26.0
2	胡忠	汕头大学生物学系	53	630	15.0	23.0
3	刘韫滔	汕头大学生物学系	3	68	2.0	3.0
4	韩学凤	汕头大学生物学系	6	9	2.0	3.0
5	罗泽宇	汕头大学生物学系	1	2	1.0	1.0
6	邱玉峰	汕头大学生物学系	1	2	1.0	1.0