变异亨廷顿蛋白对CBP组蛋白乙酰化酶活性及其蛋白表达的影响

• 作者: 丛树艳 冯娟 张威 王亚 邵华
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 亨廷顿舞蹈病 CREB结合蛋白 蛋白酶体抑制剂 变异亨廷顿蛋白 组蛋白乙酰化酶
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3773-3778
• 分类号: R318
• 字数: 6270字
• 语种: 中文

摘要

背景:目前针对转录因子CBP在亨廷顿舞蹈病发病机制中作用的研究主要集中在包涵体形成对CBP的抑制作用.目的:在亨廷顿舞蹈病细胞模型中,探讨变异亨廷顿蛋白对CBP组蛋白乙酰基转移酶活性及CBP蛋白表达的影响.方法:运用可经多西环素诱导表达绿色荧光蛋白标记的HD第一外显子片段含有23个(正常)或74个(变异)多聚谷氨酰胺片段(N-htt-Q23或-Q74)的大鼠肾上腺神经嗜铬细胞瘤PC12细胞模型,用免疫荧光显微镜观察细胞内变异亨廷顿蛋白表达,用免疫沉淀后的内源性CBP进行组蛋白H4乙酰化测定,Western blot检测CBP蛋白水平,通过外源性加入特异性蛋白酶体抑制剂MG-132,观察其对CBP蛋白水平的影响.用Lightcycler PCR检测CBP mRNA转录水平.结果与结论:多西环素诱导1 d时,N-htt-Q74只在少数细胞中形成包涵体,6 d时大部分细胞含有包涵体(>90%),而N-htt-Q23始终不形成蛋白包涵体.变异亨廷顿蛋白可抑制CBP组蛋白乙酰基转移酶活性及内源性CBP蛋白水平,但不影响CBP mRNA的转录水平.在表达N-htt-Q74细胞中,MG-132可通过影响蛋白降解部分恢复CBP蛋白水平.结果提示,除了变异亨廷顿蛋白包涵体,可溶性变异亨廷顿蛋白在早期已经开始抑制CBP组蛋白乙酰基转移酶活性和降低CBP蛋白水平,在亨廷顿舞蹈病发病的分子机制中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯娟	中国医科大学附属盛京医院神经内科	96	452	10.0	15.0
2	邵华	中国医科大学附属盛京医院神经内科	13	93	6.0	9.0
3	丛树艳	中国医科大学附属盛京医院神经内科	21	70	3.0	8.0
4	张威	中国医科大学附属盛京医院神经内科	25	67	5.0	7.0
5	王亚	中国医科大学附属盛京医院神经内科	3	16	2.0	3.0