特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定

• 作者: 刘庆堂 张改平 李青梅 李靓 杨艳艳 柴书军 职爱民 胡骁飞 邓瑞广
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 特布他林 杂交瘤 单克隆抗体 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 335-339
• 分类号: S852.43
• 语种: 中文

摘要

分别通过1，4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上，用BSA．TBL免疫BALB／c小鼠，经过3次免疫后，OVA．TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠，选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫；无茵手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株；采用体内诱生腹水法制备TBLmAb，并对TBLmAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示，免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10^-4；融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞，其细胞培养上清液效价分别为1：800和1：1600，腹水效价分别为1：2．56×10^5和1：1．02×10^6；4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5．25ng／ml，与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3％。本试验获得了抗TBLmAb，为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。