SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体

• 作者: 刘媛 刘贤进 张存政 王丽 胡秋辉 雷兆静
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 适体 SELEX 荧光 毒死蜱
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·质量安全
• 页码范围: 198-203
• 分类号: S482.2+3
• 字数: 4885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.01.036

摘要

试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体.体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选.利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析.结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00％；最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性；二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础.