猪圆环病毒Cap蛋白的分泌表达及其免疫原性研究

• 作者: 李中圣 王贵平 王霞 范红结 陈孝明
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 分泌表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 27-32
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+9.2
• 字数: 4022字
• 语种: 中文

摘要

探索利用杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac expression system)分泌表达猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白及将其作为亚单位疫苗的应用价值.将PCV2 Cap基因克隆到已插入蜂毒信号肽(Melittin)的转移载体pFastBac Ⅰ中,将鉴定正确的重组质粒(pFastBAC-Cap)转化至DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,经抗性及蓝白斑筛选得到含Cap基因的重组杆状病毒DNA(Bacmid-Cap),转染提取的Bacmid-Cap DNA转染至sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBac-Cap),应用无血清培养的High Five细胞进行重组蛋白的表达及条件优化.重组蛋白通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE)证明:在重组杆状病毒感染的High Five昆虫细胞中获得分泌表达,并可产生较高浓度的重组蛋白；Western blotting结果显示:重组蛋白可被猪PCV2的特异性抗体所识别,表明重组蛋白具有反应原性；应用重组蛋白免疫BALB/C小鼠试验结果显示:该蛋白可刺激小鼠产生较高水平的特异性抗体.该研究成功分泌表达了PCV2 Cap蛋白,该蛋白能够刺激机体产生免疫应答,为PCV2亚单位疫苗的研制打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范红结	南京农业大学动物医学院	92	629	14.0	20.0
2	王霞		25	692	16.0	25.0
4	王贵平		9	76	5.0	8.0
5	李中圣		3	22	2.0	3.0
6	陈孝明		2	20	2.0	2.0