捻转血矛线虫ES24抗原基因的克隆与表达特性分析

• 作者: 严若峰 宋小凯 徐立新 李祥瑞 牛延萍 高丽丽
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 捻转血矛线虫 排泄分泌抗原 ES24 阶段性表达 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S852.73
• 字数: 2691字
• 语种: 中文

摘要

根据捻转血矛线虫ES24抗原基因序列(U64793.1)设计1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出大小约为670 bp的DNA片段.将该DNA片段克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和分析,结果发现该基因与GenBank中已知的捻转血矛线虫24 ku ES抗原基因的相似性达96％～98％.将该基因的开放阅读框插入pET28a(+)载体中,获得原核表达质粒pET28/ES24,并转化大肠杆菌BL21.重组细菌用IPTG诱导,经SDS-PAGE分析,结果表明该基因获得了表达,重组蛋白分子量大小约为25 ku.用实时荧光定量PCR技术对该基因在捻转血矛线虫的虫卵、第3期幼虫、雌虫和雄虫等不同发育阶段、不同性别虫体内的表达情况进行了定量分析,结果显示ES24基因在雄性成虫中表达量最高,雌虫和虫卵其次,在第3期幼虫中表达最低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物医学院	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物医学院	53	256	10.0	13.0
4	宋小凯	南京农业大学动物医学院	32	84	6.0	8.0
5	牛延萍	南京农业大学动物医学院	2	1	1.0	1.0
6	高丽丽	南京农业大学动物医学院	4	5	2.0	2.0