H6亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘加波 周辰瑜 庞耀珊 彭宜 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H6亚型 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: S851.34
• 字数: 3588字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在建立一种快速、特异、敏感的H6亚型禽流感病毒(AIV)实时荧光定量RT-PCR检测方法.针对H6亚型AIV的血凝素(HA)基因序列保守区设计1对引物,并优化反应条件.结果表明,该方法的最低检测限为1.07×101拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出1 000倍；扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(80.81±0.08)℃,组内变异系数为0.08％～0.99％,组间变异系数为1.85％,可重复性好；对H1、H3、H5、H7、H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒等其他呼吸道病原体无扩增；检测快速,从样本处理到报告结果仅需3.5h.