α-硫辛酸对高压条件下培养大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

• 作者: 刘兵 毕宏生 郭大东 郭媛媛 陈宁虹 马晓华
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜神经节细胞/病理学 硫辛酸/治疗应用 细胞,培养的 动物实验
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-506
• 分类号: R774.6|R775
• 字数: 6553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2012.05.017

摘要

目的 观察α-硫辛酸对高压条件下培养大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用.方法 将RGC分为正常对照组、阴性对照组、单纯加压组、加压联合不同浓度α-硫辛酸干预组.正常对照组和单纯加压组不做任何处理;阴性对照组仅接受200 μmol/Lα-硫辛酸预处理;加压联合不同浓度的α-硫辛酸干预组分别用50、100、200 μmol/L等3种不同浓度的α-硫辛酸对其进行干预.α-硫辛酸预处理1h后,单纯加压组和各干预组置于50 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)下培养24 h;正常对照组、阴性对照组置于常压下培养24 h.分别用噻唑蓝比色法检测各组细胞的活性;4,6-联脒2-苯基吲哚(DAPI)染色观察各组细胞核形态改变;实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测并比较各组细胞中锰超氧化物歧化酶(MnSOD) mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 单纯加压组细胞活性为(65.6±3.4)％,50、100、200 μmol/L3种浓度的α-硫辛酸干预组细胞活性分别为(75.1±3.3)％、(81.8±2.9)％、(87.9±3.1)％,均较单纯加压组显著增高(t=5.108、10.007、12.513,P＜0.05).DAPI染色显示,加压后RGC-5细胞核可见空泡、染色质高度凝聚、边缘化等典型的凋亡特征,而α-硫辛酸干预组仅有部分细胞核染色质表现出浓缩现象.Real-time PCR及Western blot检测结果显示,加压培养后细胞内MnSODmRNA和蛋白相对表达量较正常对照组显著降低(t=22.045、26.979,P＜0.01);与单纯加压组相比,α-硫辛酸干预组细胞内MnSOD mRNA和蛋白相对表达量均显著增高,差异有统计学意义(t=9.171、12.267、23.567、7.723、12.009、28.198,P＜0.05);不同浓度的α-硫辛酸干预组之间,随α-硫辛酸浓度增加,MnSODmRNA和蛋白相对表达量呈升高趋势,且差异有统计学意义(F=134.273、194.597,P＜0.01).结论 应用α-硫辛酸可以显著提高高压条件下大鼠RGC的细胞活性及细胞内MnSOD的表达水平,增强细胞抗氧化损伤能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕宏生		162	541	10.0	12.0
2	马晓华		15	64	5.0	7.0
3	郭大东		37	165	7.0	10.0
4	刘兵	山东中医药大学第二临床学院	9	66	5.0	8.0
5	郭媛媛		4	11	2.0	3.0
6	陈宁虹		3	8	2.0	2.0