改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究

• 作者: 刘阳 张帅 张强 徐锐 赖翼 邓勇
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 全血基因组DNA提取 改良盐析法 红细胞裂解时间 DNA纯化方式 DNA干燥时间
• 年，卷（期）: 2012,（35）
• 所属期刊栏目: 临床论著
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 3313字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间对改良盐析法提取全血基因组DNA的影响.方法 改良盐析法提取全血基因组DNA时,分别采用不同的红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间.使用流式细胞术检测红细胞裂解后的细胞总数及死细胞比例,紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物.结果 红细胞裂解时间从10 min延长至120 min,死细胞比例随时间延长而增加,但细胞总数、DNA产量与纯度无明显变化；采用异丙醇沉淀法纯化DNA得到的DNA产量与纯度均显著高于使用DNA分离柱纯化的DNA; DNA干燥时间从120 min缩短至30 min,既不影响DNA的产量与纯度,也不影响后续PCR扩增实验.结论 改良盐析法提取全血基因组DNA时,红细胞裂解时间可延长至120 min,DNA干燥时间可缩短至30 min,异丙醇沉淀法优于DNA分离柱纯化的DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘阳	成都医学院检验医学院	30	163	6.0	11.0
2	赖翼	成都医学院检验医学院	20	112	6.0	10.0
3	张帅	成都医学院检验医学院	5	20	3.0	4.0
4	徐锐	成都医学院检验医学院	4	28	3.0	4.0
5	张强	成都医学院检验医学院	2	22	2.0	2.0
6	邓勇	成都医学院检验医学院	1	12	1.0	1.0