转染isl1基因促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

• 作者: 余细勇 刘晓颖 单志新 夏慧苏 朱杰宁 李晓红 李杏肖 林秋雄 肖定璋 麦丽萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 慢病毒 Isli蛋白 微环境 心肌样细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 131-135
• 分类号: R363
• 字数: 3480字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.01.025

摘要

目的:Isli蛋白在心脏发生和多能心脏祖细胞分化调节中发挥着重要作用,本文旨在探寻转染isl1基因是否能提高骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力.方法:利用携带isl1基因的慢病毒(LVS-isl1)感染人骨髓间充质干细胞,通过Puromycin筛选获得稳定细胞株,并对其进行RT-PCR和Western blotting鉴定.以共培养为基础,用real-time PCR、Western blotting以及免疫荧光法检测Isl1蛋白的心肌诱导能力.结果:RT-PCR和Western blotting表明成功获得稳定细胞株BMSC-isl1,real time-PCR结果显示BMSC-isl1组较之BMSCs组和BMSC-vehicle组GATA 结合蛋白4、NK2转录因子5、肌细胞增强因子2C和兰尼碱受体2的表达量分别提高了2.3、2.7、2.6和3.2倍;Western blotting以及免疫荧光法结果均提示BMSC-isl1组内心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白I和α-辅肌动蛋白的表达均比BMSCs组和BMSC-vehicle组要高.结论:转染isl基因的BMSCs不仅可以稳定表达Isli蛋白,而且在微环境共培养条件下,可以提高BMSCs向心肌细胞分化的能力.