系统性硬化病患者外周血CD4+T细胞CD40L DNA甲基化研究

• 作者: 姜红岩 廉晓日 张桂英 李亚萍 杨艳 王瑶瑶 肖嵘 胡新红 赵明 金藏拓郎 陆前进
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报道
• 页码范围: 517-519
• 分类号: R816.95
• 字数: 1992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2012.07.018

摘要

[目的]探讨系统性硬化病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态.[方法]密度梯度离心法分离SSc患者(女16例,男10例)和健康对照组(女15例,男10例)外周血单一核细胞,磁珠分选CD4+T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR扩增CD40L基因调控序列片段(包括启动子和增强子),转化进入大肠杆菌,每个样本挑取8个克隆进行测序.[结果]亚硫酸盐基因组测序结果显示,健康女性CD40L基因调控序列一半为甲基化,一半为去甲基化,女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性健康对照(P值均＜ 0.01)；男性SSc患者和男性健康对照CD40L基因启动子和增强子区域几乎全部为去甲基化,两组平均甲基化水平差异无统计学意义(P值均＞0.05).[结论]女性SSc患者CD4+T细胞中失活的X染色体上CD40L调控序列低甲基化,可能是导致CD40L在女性SSc患者CD4+T细胞中过度表达的原因之一.