以Ypt1基因为靶标的致病疫霉菌Phytophthora infestans的分子检测

• 作者: 孟军
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 致病疫霉 Ypt1基因 分子检测
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 46-53
• 分类号: S435.32|Q93-33
• 字数: 5049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.01.009

摘要

三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白.为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该序列为靶标设计了1对针对P.infestans的特异性PCR引物Pi1/Pi2.试验结果表明,在供试的55种不同疫霉菌和真菌的144个菌株中,利用这1对引物只能从P.infestans基因组DNA中分别扩增出1条分子量为369 bp的特异性条带,这1对引物的检测灵敏度为100 pg.以疫霉菌Ypt1通用引物Yph1F/Yph2R结合这1对特异引物进行套式PCR扩增,使引物Pi1/Pi2的检测灵敏度提高了10倍,检测到10 pg的基因组DNA.通过套式PCR,引物Pi1/Pi2对游动孢子和卵孢子的检测灵敏度分别为3个游动孢子和1个卵孢子；以Pi1/Pi2引物,分别采用单轮PCR和套式PCR可检测马铃薯发病组织和病田土壤的致病疫霉.以上结果证明Ypt1基因适合作为疫霉菌分子检测靶标.采用以这1对特异引物建立的以PCR技术为基础的分子检测方法,可对田间土壤和发病植物组织中的P.infestans进行快速、灵敏的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟军	环境保护部南京环境科学研究所国家生物安全重点实验室	7	15	2.0	3.0