密蒙花方对缺氧状态下脐静脉血管内皮细胞VEGF-VEGFR信号转导通路的影响

• 作者: 严京 吴正正 宋剑涛 接传红 陈皆春 高健生
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 密蒙花方 内皮细胞 缺氧 血管内皮生长因子 信号转导
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 606-609
• 页数: 4页
• 字数: 5120字
• 语种: 中文

摘要

目的 从血管内皮生长因子-血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor,VEGF-VEGFR)信号转导机制方面深入探讨密蒙花方抑制缺氧状态下人血管内皮细胞增殖的作用机制.方法 采用人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell,HUVEC)进行体外培养,利用二氯化钴(CoCl2)模拟缺氧状态,同时分别将10g·L-1、20g·L-1、40g·L-1密蒙花方水提液作用于缺氧状态下的HUVEC 24 h,采用水溶性四氮唑-8(WST-8)法检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC增殖的影响,采用Western blot法检测密蒙花方时缺氧状态下HUVEC内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、fms样酪氨酸激酶受体1(fms-like tyrosine kinase-1,Flt-1)、胎肝激酶-1/激酶插入区受体(fetal liver kinase-l/kinase insert domain-containing receptor,Flk-1/KDR)蛋白磷酸化水平的影响.采用免疫组织化学法检测HUVEC内细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达的情况.结果 WST-8法结果显示:缺氧组吸光度值为1.112±0.060,各密蒙花方组吸光度值分别为0.860±0.050、0.567±0.072、0.263±0.057,表明密蒙花方可有效抑制缺氧状态下HUVEC增殖(均为P＜0.01).Western blot结果显示:缺氧组HUVEC内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平分别为1.922±0.048、1.341±0.054,较正常组升高,Flt-1蛋白磷酸化水平为1 265±0.065,较正常组降低,密蒙花方可使缺氧状态下HUVEC内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平降低,Flt-1蛋白磷酸化水平升高,差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01).免疫组织化学显示:正常组ICAM-1吸光度值161.416±4.905,缺氧组ICAM-1吸光度值为213.464±10.282,各密蒙花组ICAM-1吸光度值分别为186.841±9.039、171.862±8.202、165.053±6.088.密蒙花方可使缺氧状态下HUVEC内ICAM-1蛋白表达减少.结论 下调细胞内VEGF、Flk-1/KDR蛋白磷酸化水平,上调细胞内Flt-1蛋白磷酸化水平,干预细胞内VEGF-VEGFR信号转导通路,是密蒙花方抑制缺氧状态下HUVEC增殖的作用机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋剑涛		63	354	11.0	15.0
2	高健生		114	817	15.0	22.0
3	吴正正		35	204	9.0	12.0
4	接传红		82	577	14.0	20.0
5	严京		37	254	9.0	15.0
6	陈皆春		7	73	5.0	7.0