多能干细胞核心调控基因Nanog介导生殖母细胞减数分裂的作用研究

• 作者: 姜蓉 彭彦 王亚平 王璐
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Nanog基因 人类 生殖细胞 减数分裂
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 686-690
• 分类号: Q954.43
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨多能干细胞核心调控基因Nanog在原始生殖纽胞(PGCs)向生殖母细胞方向分化过程中的作用.方法 取11.0d胎鼠PGCs,按胚胎干细胞(ES)培养标准进行体外胚胎生殖细胞(EG细胞)培养.采用脂质体方法将Nanog靶向特异性小干扰RNA(siRNA)转染人EG细胞.RT-PCR、免疫荧光法检测siRNA的沉默效率；在倒置相差显微镜下进行体外克隆计数,检测EG细胞增殖未分化状态；TUNEL法和透射电镜检测EG细胞凋亡情况；半定量RT-PCR检测与生殖母细胞减数分裂相关的标志基因(Mvh、Stra8、Sycp3)的mRNA表达.结果 转染siRNA后48h EG细胞Nanog mRNA和蛋白表达明显受抑,典型未分化EG细胞克隆数量显著下降,呈现分化现象,悬浮细胞增多.TUNEL法、透射电镜检测悬浮EG细胞呈现凋亡征象.伴随Nanog表达下调,Mvh、Stra8、Sycp基因mRNA表达上调.结论 到达生殖腺后,多能性PGCs发生生殖母细胞化,开始减数分裂,该过程可能与多能干细胞核心调控基因Nanog的表达下调有关.