紫外光-核黄素诱导羊膜胶原交联的实验研究

• 作者: 孙旭光 李然 梁庆丰 王智群 赵红红 邓世靖
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜 紫外光 核黄素 胶原交联
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 127-131
• 分类号: R77
• 字数: 4310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2012.02.009

摘要

背景 研究证实,紫外光-核黄素光动力疗法可通过改变角膜的理化性质控制圆锥角膜的进展,羊膜移植已广泛用于眼表疾病,羊膜胶原成分与角膜相似,目前关于紫外光-核黄素诱导的胶原交联用于羊膜组织的研究尚少见.目的 探讨紫外光-核黄素对冻存羊膜的作用. 方法 在知情同意条件下,获取并常规处理人羊膜组织,-80℃保存.制备成2 mm×15 mm大小,用简单随机法中的抽签法将其分为4个组,每组6片羊膜,前3组均给予紫外光-核黄素(质量分数0.1％)处理30 min(波长为370 nm,紫外光功率分别为1、2、3 mW/cm2,光源距羊膜10 mm),第4组不做任何处理,为对照组.利用微力材料试验机对处理后的各组羊膜分别进行生物力学测量,记录羊膜长度改变5％、10％、15％时各组样本所需的拉力值(mN).用环钻钻取直径7 mm的羊膜,用抽签法将其分为4个组,每组5片羊膜,各组处理情况同上,将处理后的各组羊膜浸于质量分数0.1％胶原蛋白酶Ⅰ溶液中进行消化,对羊膜透明度进行评分,并记录羊膜完全溶解时间.关于羊膜的组织学观察,用抽签法将羊膜分为紫外光-核黄素组、核黄素组及对照组,每组3片羊膜,各组分别给予紫外光-核黄素(0.1％)处理30 min(波长为370 nm,紫外光功率为3 mW/cm2,光源距羊膜10 mm)、0.1％核黄素浸泡30 min和生理盐水浸泡30 min,透射电子显微镜下进行观察. 结果 羊膜长度改变5％、10％、15％时,对照组和1、2、3 mW/cm2紫外光组4个组所需拉力值差异均有统计学意义(F=3.411,P=0.037；F=9.927,P=0.001;F=11.118,P=0.000)；交联后抗拉力性能明显增强,且紫外光功率越大,羊膜的抗拉性增加越明显,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组羊膜完全酶解时间为(8.6±1.8)h,1、2、3 mW/cm2紫外光组分别为(39.6±2.3)、(71.4±0.9)、(78.8±1.8)h,交联后抗酶解能力增强,且紫外光功率越大,羊膜的抗酶解能力增强越明显,差异有统计学意义(P＜0.01).透射电子显微镜超微结构观察,交联后羊膜基质层胶原纤维密度增加、胶原间连接增多、胶原与上皮间的连接加强.结论 紫外光-核黄素可使冻存羊膜发生胶原交联,从而使其组织结构发生变化,生物力学性质改变,抗酶解能力加强.