猪链球菌2型PCR-ELISA检测方法的建立与优化

• 作者: 方勤美 朱继昌 林天龙 池洪树
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪链球菌2型、PCR-ELISA cps2j基因
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1275-1279
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 4131字
• 语种: 中文

摘要

根据已发表的猪链球菌2型的cps2j基因序列,设计合成上游标记生物素的1对引物和1条标记地高辛的特异性探针,建立了该菌的PCR-ELISA检测方法.方法利用PCR仪作为杂交场所,并对几个主要条件参数进行优化,结果显示在鲑鱼精DNA浓度1.6mg· mL-1、变性温度为94℃、变性时间为1 min、探针浓度为0.5umol·mL-1、杂交温度55℃、杂交时间1 min、一抗作用时间45 min、二抗作用时间40 min时检测方法敏感性最好,特异性最强.通过对17个阴性样本检测,测得平均值为0.057,方差为0.047,计算得临界值为0.198.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方勤美	福建省农业科学院生物技术研究所	15	101	5.0	9.0
2	林天龙	福建省农业科学院生物技术研究所	89	1214	18.0	31.0
3	池洪树	福建省农业科学院生物技术研究所	10	27	2.0	5.0
7	朱继昌	福建省农业科学院生物技术研究所	3	16	2.0	3.0