H9N2亚型禽流感病毒M1基因在大肠杆菌中的原核表达

• 作者: 曹维伟 朱小甫
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 M1基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 26-29
• 分类号: S851.34+7.1
• 字数: 3304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2012.01.005

摘要

采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒M1基因,将M1结构基因克隆于pMD18-T载体.测序结果表明,插入的片段为M1目的基因.切下目的基因M1,重组到含有谷胱苷肽(GST)的融合蛋白原核表达载体pET-32a(+),获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定表明,M1基因插入的位置、大小和读码框架均正确,证明成功构建融合表达载体pET-32a-M1.构建好的重组质粒经1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到大量表达,经过6h表达量达到高峰.融合蛋白M1的分子质量为29.8 ku,以包涵体形式存在.Western-Blot及ELISA分析表明,融合蛋白能够与M1单克隆抗体发生特异性反应,说明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱小甫		60	121	5.0	8.0