6种沙门菌单克隆抗体的制备和效能评价

• 作者: 周蕾 张丽丽 张平平 杨瑞馥 王津 王浩然
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 沙门菌 单克隆抗体 效价评价 特异性评价
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 813-816
• 分类号: R392.1
• 字数: 3628字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.06.010

摘要

目的:制备稳定、特异、高亲和性的分别针对甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的单克隆抗体.方法:用甲醛灭活的菌液抗原免疫 BALB/c 小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;用灭活的菌液包被酶标板,ELISA 筛选阳性克隆株,建立细胞系;选取高效分泌杂交瘤细胞,常规制备腹水并纯化,进行单抗特异性与亲和性评价.结果:筛选得到分泌6种沙门菌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞株,获得高亲和性单抗;所有单抗与大部分病原菌(包括7种沙门菌、3株志贺菌、2株李斯特菌、4株致病性大肠杆菌、2株霍乱弧菌)无交叉反应,但由于同类型 O 抗原的广泛分布,抗乙型副伤寒沙门菌单抗与鼠伤寒沙门菌、抗伤寒沙门菌单抗与肠炎沙门菌有明显的交叉反应.结论:沙门菌单抗的制备,为感染性腹泻的监测、诊断奠定了基础.