凝血酶诱导糖蛋白Ibα酶切的分子机制研究

• 作者: 夏菁 张晓峰 王国华 王志成 罗梅宏
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板 凝血酶 活性氧 GPIbα酶切
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1283-1287
• 分类号: R558|R331.1+43|R34
• 字数: 3344字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨凝血酶诱导糖蛋白(GP)Ibα酶切的分子机制.方法 取健康志愿者静脉血,分离得到洗涤血小板.洗涤血小板分别与钙离子依赖蛋白酶(calpain)抑制剂、活性氧(ROS)抑制剂、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂、线粒体靶向的ROS抑制剂、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)抑制剂、前列腺素E1(PGE1)、解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)抑制剂或溶剂对照等预孵育,再与凝血酶(在搅拌或非搅拌条件下)孵育.流式细胞仪检测ROS浓度,Western blot检测GPIbα的酶切和calpain底物talin的酶切.结果 ROS抑制剂二硫苏糖醇(DTT)和calpain抑制剂MDL单独使用时,均部分抑制凝血酶(搅拌条件下)诱导的GPIbα酶切;联合使用时,则完全抑制凝血酶(搅拌条件下)诱导的GPIbα酶切.DTT完全抑制凝血酶(非搅拌条件下)诱导的GPIbα酶切,而MDL没有抑制作用.另外,caspase抑制剂和血小板活化抑制剂(PGE1)不抑制凝血酶诱导的GPIbα酶切.凝血酶(非搅拌条件下)剂量依赖地引起血小板ROS浓度升高;NAD(P)H氧化酶抑制剂抑制凝血酶引起的ROS浓度升高,线粒体靶向的ROS抑制剂则没有抑制作用.结论 在搅拌条件下,ROS和calpain两条信号通路共同调控凝血酶诱导的GPIbα酶切;在非搅拌条件下,通过NAD(P)H氧化酶产生的ROS调控凝血酶诱导的GPIbα酶切.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张晓峰	上海中医药大学附属市中医医院实验中心	30	292	11.0	16.0
2	王志成	上海中医药大学附属市中医医院实验中心	4	15	2.0	3.0
4	罗梅宏	上海中医药大学附属市中医医院实验中心	18	61	5.0	7.0
5	王国华	上海中医药大学附属市中医医院实验中心	33	29	4.0	5.0
8	夏菁	上海中医药大学附属市中医医院实验中心	4	21	2.0	4.0