血细胞多态性细胞工程实验室的建立

• 作者: 刘学军 卢芳 吴国光 周燕 李丽兰 申卫东 钟周琳 黎海燕
• 来源期刊: 广西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 血细胞 细胞工程 永生化细胞株 实验室
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 278-281
• 分类号: R457.11
• 字数: 2883字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-4304.2012.03.007

摘要

目的 建立稀有型血细胞永生化细胞株,探讨血细胞多态性细胞工程实验室建立的方法.方法 采用EB病毒转化技术,把携带稀有血型抗原的红细胞、已知抗原特异性的粒细胞,罕见特异性抗原的血小板及CD36缺失型的血小板的外周血淋巴细胞转化成永生化淋巴母细胞株,采用培养法和PCR法对细胞株进行支原体检测,染色体核型分析细胞株的稳定性.结果 共建立稀有型血细胞LCLs 211株,其中稀有红细胞血型抗原LCLs 64株、已知抗原特异性的粒细胞抗原LCLs 8株、罕见特异性抗原的血小板LCLs 15株及CD36缺失型血小板LCLs 124株,总转化成功率为91%;所有的细胞株传代、冻存和复苏均成活,无基因突变、无支原体污染.经20代传代后未发现染色体突变.结论 传代培养、细胞冻存、复苏和支原体污染防范等一整套技术过程基本满足建库要求,为血细胞多态性细胞工程实验室的建立提供科学依据.