美达霉素产生菌中立体专一性酮基还原酶基因med-ORF12的表达

• 作者: 刘明 孙锐 宫彩霞 曾爱兵 李爱英 王蔚
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 链霉菌 次生代谢 美达霉素 立体专一性酮基还原酶
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 生理和代谢
• 页码范围: 60-68
• 分类号: Q935
• 语种: 中文

摘要

美达霉素是链霉菌产生的具有强抗肿瘤活性的芳香聚酮类抗生素,其砒喃环并内酯结构对于其抗癌活性非常重要.位于美达霉素生物合成基因簇中的基因med-ORF12编码立体专一性酮基还原酶,可能参与美达霉素的砒喃环并内酯结构中手性中心(C3S)的形成,但在美达霉素产生菌中的功能和表达还未曾研究.[目的和方法]为了研究med-O RF12在野生菌中的表达情况以及与美达霉素生物合成的关系,本文采用了原核表达、抗体制备、免疫杂交等技术方法对这个基因展开了体内表达研究.[结果]首先利用pET载体建立了med-ORF12的原核表达系统,在优化诱导表达条件的基础上获得了可溶性目的蛋白,制备了相应的多抗血清；然后利用多抗血清对美达霉素产生菌中的基因med-ORF12的表达情况进行了检测,表明在美达霉素产生菌中参与次生代谢的med-ORF12在稳定期大量表达,同时伴随美达霉素的大量积累.[结论]这些结果表明在美达霉素产生菌中,基因med-ORF12参与次生代谢,其表达与美达霉素生物合成有一定相关性.