重组人肿瘤坏死因子α抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学活性检测

• 作者: 丁红梅 夏伟 李少华 李慧 李洁 王玮 苏雪婷 赵强 邵宁生 陈颖 高波 黄皑雪
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肿瘤坏死因子α 抑制肽 抗炎酸性尾巴 TRX 标签 融合蛋白 细胞毒作用
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 837-839
• 分类号: Q78
• 字数: 2941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.06.016

摘要

目的:评价原核表达、纯化的6×His-硫氧还蛋白(TRX)-人肿瘤坏死因子α(TNFα)抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学功能.方法:在大肠杆菌中分别表达带 His 标签的 TRX 对照蛋白及 TRX 蛋白融合的人 TNFα抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白,并对2种蛋白进行 N2+金属螯合层析纯化,采用 MTT 法检测纯化后的蛋白及化学合成多肽抑制 TNFα标准品对 L929细胞的细胞毒活性.结果:与对照蛋白相比,融合蛋白人 TNFα抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴及合成多肽均能拮抗 TNFα标准品对 L929细胞的细胞毒作用.结论:融合蛋白人 TNFα抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴及合成肽均能有效拮抗 TNFα的生物学作用,为今后发展抑制 TNFα为主的抗炎生物药物奠定了基础.