Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞神经分化中的作用

• 作者: 张广宇 彭涛 彭越 王翠琴 王舒阳 贾延劼 韩瑞 鲁晶晶
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Oct3/4 骨髓间充质干细胞 神经元 慢病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 385-392
• 分类号: R329.21
• 字数: 5591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.03.001

摘要

目的:探讨Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元中的作用.方法:构建大鼠Oct3/4慢病毒载体(Oct3/4-LV)并感染大鼠MSCs;实验分为感染组(感染Oct3/4-LV)、阴性对照组(感染FU-PGC-NC-LV)和未感染组3组;采用β-巯基乙醇诱导各组大鼠MSCs分化为神经元.倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后形态学变化;MTT法检测细胞存活率;免疫细胞化学法检测神经元烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白 2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 和Oct3/4的表达变化;Western blotting法检测MAP-2和Oct3/4蛋白的表达变化;RT-PCR法检测MAP-2和Oct3/4 mRNA的表达变化.结果:(1)阳性克隆PCR证明大鼠Oct3/4慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为2×1011 TU/L.(2)倒置显微镜下观察大鼠Oct3/4慢病毒载体感染成功,感染复数(MOI)值为10,感染48 h时感染率最高,荧光表达最强;感染率可达83.4%±2.2%.感染组中,MSCs形态发生变化;MTT提示感染组细胞存活率显著降低(P＜0.05).(3)β-巯基乙醇可以诱导大鼠MSCs向神经元分化,其中以感染组诱导效果最佳,具有比较典型的神经元形态,NSE和MAP-2的表达率与其它各组相比显著增高(P＜0.05).(4)感染组与其它各组同时点的Oct3/4表达相比均显著增高(P＜0.01).并且随着诱导时间的延长,各组Oct3/4表达持续减少,诱导后5 h与诱导前相比存在显著差异(P＜0.05).结论:Oct3/4在大鼠MSCs分化为神经元的过程中可能起到了重要的调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭涛	郑州大学第一附属医院神经内科	40	119	7.0	9.0
2	韩瑞	郑州大学第一附属医院神经内科	10	36	3.0	6.0
3	张广宇	郑州大学第一附属医院神经内科	14	27	4.0	5.0
4	王翠琴	郑州大学第一附属医院神经内科	4	11	2.0	3.0
5	彭越	郑州大学第一附属医院神经内科	4	11	2.0	3.0
6	鲁晶晶	郑州大学第一附属医院神经内科	13	43	4.0	6.0
7	王舒阳	郑州大学第一附属医院神经内科	7	24	2.0	4.0
8	贾延劼		4	31	3.0	4.0