酵母双杂交技术筛选与HBeAg结合的胰腺细胞蛋白

• 作者: 李朝品 王晓春
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒e抗原 胰腺细胞 酵母双杂交 代谢综合征
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 927-931
• 分类号: R373.2
• 字数: 3715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.09.014

摘要

目的 应用酵母双杂交技术筛选人类胰腺细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用的结合蛋白.方法 醋酸锂法将诱饵质粒pGBKT7-HBeAg转化酵母菌AH109;同时扩增纯化人胰腺细胞cDNA文库并转化酵母菌株Y187.应用酵母双杂交系统3将二者进行配合,在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和X-α-gal上进行双重筛选.提取阳性菌落质粒并电击转化感受态大肠埃希菌DH5α,BglⅡ酶切鉴定及与诱饵质粒的共转化回交实验验证,将阳性克隆测序并在GenBank里进行同源性比对和生物信息学分析.结果 初步筛选出包括顺乌头酸酶在内的13个与HBeAg相互作用的蛋白.结论 HBeAg可能与胰腺文库蛋白相互作用,与2型糖尿病和肝脏脂肪变性等代谢性疾病密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝品		235	781	13.0	17.0
2	王晓春	安徽理工大学医学院	27	34	3.0	4.0