靶向EZH2基因的短发夹RNA表达载体的构建及其对人结肠腺癌SW480细胞的增殖抑制作用

• 作者: 吕艳锋 王建新 韩冰冰
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EZH2基因 RNA干扰 结肠肿瘤 SW480细胞 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 730-733
• 分类号: R971.1
• 字数: 2686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2012.10.003

摘要

目的 构建靶向EZH2基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探讨抑制EZH2基因表达对结直肠癌细胞增殖的影响.方法 根据EZH2 cDNA序列设计具有短发夹结构的DNA序列,构建重组表达载体,鉴定后转染至SW480细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测EZH2基因的抑制效果,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测EZH2抑制对SW480细胞增殖的影响.结果 EZH2基因shRNA表达质粒转染48 h后,基因沉默组和阴性对照组细胞中EZH2mRNA的相对表达水平分别为0.339±0.013和1.968±0.072,EZH2蛋白的相对表达水平分别为0.229±0.008和1.168 ±0.053,基因沉默组均明显低于阴性对照组(P＜0.01,P＜0.05).转染后48、72 h,细胞生长抑制率分别为30.7％和25.9％,与空白对照组比较细胞生长受到明显抑制(P＜0.05).结论 靶向EZH2基因的shRNA重组表达载体构建成功,并能显著抑制EZH2基因的表达.沉默EZH2基因能明显抑制结直肠癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建新	山东大学第二医院肛肠外科	25	144	6.0	11.0
2	韩冰冰	山东中医药大学微循环实验室	70	290	11.0	13.0
3	吕艳锋	山东大学第二医院肛肠外科	26	105	6.0	9.0