噬菌体抗体库中筛选特异结合新甲型H1N1病毒scFv分子的研究

• 作者: 吴锦银 武婕
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新甲型H1N1病毒 人源化单链抗体 噬菌体文库 筛选
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究论著
• 页码范围: 951-954
• 分类号: R511
• 语种: 中文

摘要

目的 从人源化噬菌体抗体库中筛选到能高亲和性、特异结合新甲型H1N1流感病毒的单链抗体,为分析H1N1病毒抗原中和表位的活性位点和人源化治疗单抗奠定基础.方法 将细胞培养的新型H1N1病毒毒株,经超速离心浓缩纯化后,获得纯的新甲型H1N1病毒,以新甲型HIN1病毒为靶蛋白,以亲和结合为原理,筛选噬菌体scFv抗体文库,经过3轮筛选富集后,随机挑选了96个噬菌体克隆扩增培养,ELISA法挑选能特异性、高亲和性结合目的蛋白的噬菌体克隆.结果 经过3轮富集性的亲和筛选,分别从96个噬菌体克隆中挑选到了4株能特异结合新甲型H1N1病毒,而不结合季节性H1N1病毒的单链抗体分子,且PCR扩增都得到了长为368、527和935 bp的轻链、重链和轻链-连接片段-重链的基因片段.结论 从噬菌体抗体库中筛选到的特异结合新甲型H1N1病毒的单链抗体片段,可为进一步研发新甲流的H1N1快速筛选试剂和人源性治疗抗体奠定基础,也可为鉴定新甲型H1N1病毒中的抗原决定簇提供结构信息.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武婕		12	27	2.0	5.0
2	吴锦银		7	25	2.0	5.0