猪肺炎支原体P46基因的原核表达与间接ELISA方法的建立

• 作者: 宁宜宝 杨汉春 沈青春 王芳 范学政 覃青松 韩明远
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P46蛋白 原核表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 431-437
• 分类号: S852.62
• 字数: 6241字
• 语种: 中文

摘要

猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体,本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆,并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG,然后再克隆到pET28a(+)载体中,在大肠杆菌BL21 (DE3)细胞内实现了高效表达,表达产物相对分子质量约为31 ku,约占菌体总蛋白35％,表达形式为包涵体,通过Western blotting 证明表达产物与猪肺炎支原体高免血清具有很好的反应原性和特异性.将大肠杆菌表达的猪肺炎支原体P46重组蛋白经过洗涤、过柱纯化后,作为间接ELISA包被抗原用于检测猪血清中猪肺炎支原体抗体,通过对各参数和试剂的优化建立了rP46-ELISA方法,获得了较好的效果,通过与现有ELISA检测方法的比较,结果表明二者间具有较高的符合率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨汉春	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	277	4554	34.0	54.0
2	范学政		43	501	11.0	21.0
3	宁宜宝		119	1253	19.0	30.0
4	沈青春	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	16	299	7.0	16.0
8	王芳		14	147	5.0	12.0
9	韩明远		4	41	3.0	4.0
10	覃青松		3	121	3.0	3.0