Tf-PEG-PEI载细胞特异性干扰质粒靶向沉默前列腺癌核干因子的体外实验研究

• 作者: 刘冉录 张志宏 徐勇 王文滪
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚乙烯亚胺 前列腺肿瘤 前列腺特异性膜抗原 核干因子 基因疗法
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 725-729
• 分类号: R744.7
• 字数: 5913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2012.10.002

摘要

目的 探讨非病毒基因转移载体转铁蛋白-聚乙二醇-聚乙烯亚胺(Tf-PEG-PEI)载前列腺特异性膜抗原增强子/启动子(PSMAe/p)为驱动序列的干扰质粒的细胞特异性沉默效果.方法 应用聚乙二醇(PEG)修饰聚乙烯亚胺(PEI),偶联转铁蛋白(Tf)合成靶向载体Tf-PEG-PEI.以Tf-PEG-PEI为载体将细胞特异性干扰质粒pPSMAe/p-shNS-ploy (A)转入前列腺癌LNCap和PC-3细胞中,观察细胞形态变化,检测核干因子(NS)基因和蛋白水平、细胞增殖情况以及细胞周期的变化.结果 成功修饰靶向载体Tf-PEG-PEI,细胞转染后,表达前列腺特异性膜抗原的LNCap细胞中NS表达水平显著降低,细胞膜边缘突起增多,更趋向于分化,细胞增殖速度减慢.在LNCaP细胞中,干扰组S期细胞的百分率[(14.17±0.32)％]明显低于载体组[(19.65±0.64)％]和对照组[(20.61±0.80)％,均P＜0.01)];干扰组G1期细胞的百分率[(74.69±1.01)％]高于载体组[(71.06±0.38)％]和对照组[(70.17±0.32)％,均P＜0.01].而在各组PC-3细胞中,干扰组、载体组和对照组处于S期的百分率分别为(28.86±1.13)％、(29.47±0.47)％和(29.86±0.36)％,差异无统计学意义(P＞0.05);处于G1期的百分率分别为(63.34 ±0.81)％、(62.56±0.62)％和(61.71±1.07)％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 非病毒载体Tf-PEG-PEI具有高效基因转移的能力,PSMAe/p驱动shRNA靶向干扰NS基因具有细胞特异性,使用细胞特异性启动子是实现前列腺癌靶向基因治疗的有效策略.