人nanog-delta48基因的克隆及其真核表达载体的构建

• 作者: 张吉翔 章诺贝 邓璐林
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 基因 干细胞 剪接体 克隆,分子 基因表达 转染 人类
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 912-915
• 分类号: R9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2012.09.015

摘要

目的:构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,检测其在肝癌SMMC-7721细胞中的表达.方法:通过RT-PCR的方法克隆nanog基因的选择性剪接变异体nanog-delta48全长编码序列,连接入pMD18-T载体,经鉴定正确后亚克隆入pcDNA5/FRT,构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,测序无误后经脂质体介导转染到SMMC-7721细胞中,通过RT-PCR初步鉴定其在SMMC-7721细胞中的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染前后的细胞增殖活力.结果:成功克隆nanog-delta48基因全长编码区,测序证明pcDNA5/FRT-nanog-delta48重组真核表达载体构建成功,使其在SMMC-7721细胞中过表达,MTT检测nanog-delta48转染入SMMC-7721细胞后,增殖能力增强.结论:剪接变异体nanog-delta48基因可能具有与nanog基因类似的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张吉翔	江西省分子医学重点实验室南昌大学第二附属医院消化内科	24	159	7.0	12.0
2	邓璐林	江西省分子医学重点实验室南昌大学第二附属医院消化内科	1	0	0.0	0.0
3	章诺贝	江西省分子医学重点实验室南昌大学第二附属医院消化内科	1	0	0.0	0.0