新城疫病毒Italien株辅助质粒的构建及功能鉴定

• 作者: 任臻 南刚 尉丁 胡福泉 边惠洁 陈志南
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新城疫病毒 遗传学技术 溶瘤病毒 重组 辅助质粒
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 702-706
• 分类号: R373-33
• 语种: 中文

摘要

目的 构建基于T7启动子的含新城疫病毒(NDV)Italien株核衣壳蛋白(NP)、磷酸化蛋白(P)和蛋白(L)基因的表达质粒,作为构建重组NDV所需的辅助质粒.方法 将NDV的NP、P和L基因酶切后置于T7启动子和核糖体进入位点序列的下游,分别构建NP、P和L基因的表达质粒,转染BSR-T7/5细胞,采用间接免疫荧光法(1FA)检测病毒蛋白的表达,利用微型基因组(MG-L)质粒检测辅助质粒组装核糖核酸蛋白质复合物(RNP)的功能.结果 测序证实辅助质粒构建正确.IFA检测可观察到NP和P基因的表达.与MG-L单转染对照组和空白对照组相比,辅助质粒和MG-L共转染后,报告基因萤火虫荧光素酶得到高效表达(P＜0.001).结论 成功构建了基于T7启动子的NDV辅助质粒,为进一步构建重组溶瘤NDV Italien株奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任臻	重庆第三军医大学微生物学教研室	1	1	1.0	1.0
2	胡福泉	重庆第三军医大学微生物学教研室	1	1	1.0	1.0