腺相关病毒介导HSV-tk/GCV系统对晶状体上皮细胞的旁观者效应及机制

• 作者: 丁芝祥 张玉明 彭燕一 曾新生 邱梅园
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 旁观者效应 单纯疱疹病毒胸苷激酶 晶状体上皮细胞 腺相关病毒
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 708-711
• 页数: 4页
• 字数: 4302字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,rAAV2)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷( HSV-tk/GCV)系统对体外培养兔晶状体上皮细胞(N/N 1003A)的旁观者效应,并初步探讨其机制.方法 rAAV2载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent,EGFP)转染体外培养N/N1003A细胞,倒置荧光显微镜观察细胞中EGFP的表达,流式细胞仪检测病毒的转染效率.重组病毒rAAV2/HSV-tk转染体外培养的N/N1003A细胞(N/N1003A-tk),以不同比例与没有转染的细胞混合,MTT法观察旁观者效应；MTT法检测N/N 1003 A-tk/GCV处理的条件培养液(CM)对N/N1003A细胞的作用.应用相差显微镜、透射电镜观察条件培养液对N/N1003A细胞形态学和超微结构的影响.结果 rAAV2载体能介导EGFP基因稳定转染N/N1003A细胞,转染效率最高达81.12％.当N/N1003A-tk细胞以不同比例(l0％、20％、40％、80％、100％)与N/N1003A混合时,细胞抑制率分别为49.00％±0.49％、54.71％±1.41％、59.26％±1.13％、68.20％士0.76％、73.44％±1.26％,与对照组(1.68％±0.45％)比较,差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01).N/N1003A-tk/GCV处理的条件培养液可明显杀伤N/N1003A细胞,但将其用0.22 μm滤膜过滤后,对细胞的杀伤作用消失.条件培养液处理的N/N1003A细胞出现凋亡征象.结论 rAAV2介导的HSV-tk/GCV系统对兔晶状体上皮细胞有较强的旁观者效应,通过非细胞接触方式诱导旁观者细胞凋亡可能是其机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭燕一	桂林医学院附属医院眼科	74	181	6.0	9.0
2	张玉明	桂林医学院附属医院眼科	25	121	6.0	9.0
3	邱梅园	桂林医学院附属医院眼科	12	34	3.0	5.0
4	丁芝祥	桂林医学院附属医院眼科	32	77	5.0	7.0
5	曾新生	桂林医学院附属医院眼科	24	47	4.0	5.0