水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化

• 作者: 付强 刘振方 卢克焕 张明 杨丽 薛雯
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 水牛 精子 双向电泳 蛋白质组学 裂解液
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 151-155
• 分类号: S823
• 字数: 3713字
• 语种: 中文

摘要

建立和优化一种适合水牛精子蛋白质组学研究的双向电泳技术.以水牛精子为研究对象,比较两种不同配方的裂解液,以及不同上样量对其2-DE图谱质量的影响.结果显示,以7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4％CHAPS、1％DTT、0.5％Cocktail of protease inhibitors为裂解液,24 cm胶条上样量200 μg时,可获得较好的精子总蛋白质2-DE图谱.运用ImageMaster 2-D platinum分析软件检测出约500个蛋白质点,蛋白质大部分分布在等电点5-7之间,分子量范围约40-90 kD.