花生C4H和ANR基因的克隆与表达研究

• 作者: 李爱芹 王兴军 纪鸿飞 苏磊 袁美 马敬
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 花生 cDNA文库 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 43-48
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

通过构建花生未成熟种子cDNA文库,结合大规模EST测序,首次从花生中克隆了原花青素代谢途径上的2个关键酶[肉桂酸-4-羟化酶（C4H）和花青素还原酶（ANR）]基因的全长编码序列。序列分析表明,与其他植物的C4H相比,花生C4H整个编码区高度保守,开放阅读框长度1518bp,编码蛋白长度505个氨基酸,预测的蛋白分子量为57.9kDa,等电点为9.04。花生中ANR开放阅读框长度966bp,编码蛋白长度321个氨基酸,预测的蛋白分子量为35kDa,等电点为8.31。亚细胞定位预测分析表明,C4H定位在线粒体中,ANR则定位在胞外。半定量RT-PCR结果表明,C4H在花生根、茎、叶、花、果针、种子中均有表达,但在茎、叶中表达相对较低,而原花青素合成途径中的关键酶ANR在各个组织中均有表达,其中在果针中表达最强。