重组蛋白A亲和填料的制备及其性能评价

• 作者: 吴彦卓 徐明波 王俊玲 郭明明 高向东
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 重组金黄色葡萄球菌蛋白A 亲和填料 制备 纯化 抗体
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与应用
• 页码范围: 86-90
• 分类号: O658
• 字数: 3235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2011.08018

摘要

为了获得一种优良的抗体纯化介质,制备了重组金黄色葡萄球菌蛋白A( rProtein A)亲和填料,并考察了所制备的亲和填料的纯化性能.利用自行构建的rProtein A工程菌,经诱导表达、纯化获得rProtein A纯品,将其偶联到经环氧氯丙烷活化的Sepharose 4 Fast Flow凝胶上,得到rProtein A亲和填料,并使用兔抗尿酸氧化酶抗体对该填料的性能进行验证.结果显示,在自制的rProtein A亲和填料上rProteinA浓度为1.5×10-4 mol/L.采用Scatchard模型分析,得到其解离常数和最大表观吸附量分别为2.28×10-7 mol/L和20.697 g/L,说明制得的rProtein A亲和填料对抗体有很好的结合能力.将该填料于0.1 mol/L NaOH溶液中浸泡1h,其色谱性能未见变化.将该填料用于纯化兔抗体,湿胶结合抗体量可达19 mg/mL；一步柱色谱即可得到电泳纯度的抗体样品,回收率高于96％.本研究为rProteinA亲和填料的国产化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴彦卓		10	17	2.0	3.0
2	徐明波		16	27	3.0	4.0
3	高向东	中国药科大学生命科学与技术学院	188	1604	21.0	30.0
4	郭明明	中国药科大学生命科学与技术学院	1	1	1.0	1.0
8	王俊玲		1	1	1.0	1.0