利用番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆转化烟草获得抗病突变体

• 作者: 何冰 刘蔼民 吴丹 张保龙 杨郁文 袁洪波 郭佳茹 陈天子
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄黄化曲叶病毒 侵染性克隆 烟草 体细胞无性系 再生植株
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 1241-1246
• 页数: 6页
• 分类号: S572
• 字数: 4105字
• 语种: 中文

摘要

为了获得烟草抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)突变体材料,以含有番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆PTYj01的农杆菌EHA105侵染转化烟草叶片,用50 mg/L卡那霉素对愈伤组织进行筛选,愈伤组织继代培养120 d左右后进行植株再生.挑取表型正常、无TYLCV病症的再生烟草45株,经PCR鉴定均整合有TYLCV DNA序列.将表型正常的再生植株移栽,温室接种烟粉虱传毒鉴定再生烟草在整个生育期对TYLCV的抗性,共获得8株表型正常、无TYLCV病症的烟草.对这8个抗性植株T2代烟草进行农杆菌注射法和接种烟粉虱鉴定,发现T2-2、T2-7的T2代分离群体中有约75％的植株没有发病症状；对这2个株系的抗性植株进一步进行卡那霉素抗性鉴定,发现其卡那霉素的抗性也符合3∶1的分离比例,说明株系T2-2、T2-7可能发生了抗TYLCV突变.可见,通过对侵染性克隆转化的烟草进行体细胞离体筛选,获得抗TYLCV突变体的方法是可行的.