伏马菌素B_1人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

• 作者: 侯玉泽 张小辉 张改平 王耀 胡骁飞 裴亚峰 邓瑞广 龚芳
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 伏马菌素B1 人工抗原 多抗血清 ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 113-117,140
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 4159字
• 语种: 中文

摘要

本研究合成并鉴定伏马菌素B1（FB1）人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源FB1多克隆抗血清。采用碳二亚胺（EDC）法将FB1分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫抗原FB1-BSA和检测抗原FB1-OVA,经鉴定后,分别按10和30μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫30d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达1∶104以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为61.3ng/ml,且具有良好的特异性。本试验成功合成了FB1人工抗原,并制备了敏感性高、特异性好的鼠源多克隆抗体血清,为FB1单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。