猕猴桃花青素合成途径基因AcCHS和AcLDOX的克隆与表达分析

• 作者: 姜正旺 张亮 满玉萍 王彦昌
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猕猴桃 红肉 花青素 查尔酮合成酶 无色花青素双加氧酶 基因 表达
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 2124-2132
• 分类号: S663.4
• 语种: 中文

摘要

根据物种水平上蛋白保守序列设计特异引物，扩增获得‘红阳’猕猴桃花青素合成途径中查尔酮合成酶（chalcone synthase，CHS）和无色花青素双加氧酶（leucoanthocyanidin dioxygenase，LDOX）基因的特异片段，用RACE（rapid-amplification of cDNA ends）技术克隆出这两个基因的cDNA全长，长度分别为1501 bp（AcCHS）和1381 bp（AcLDOX），分别编码389个和355个氨基酸。通过比对发现AcCHS与棉花（Gossypium hirsutum）、山茶（Camellia japonica）和黄蜀魁（Abelmoschus manihot）的CHS序列相似性较高，达到95%，与葡萄（Vitis vinifera）和苹果（Malus × domestica）的相似性分别为94%和93%；AcLDOX与山葡萄（Vitis amurensis）和葡葡的相似性分别高达94%和93%。用实时荧光定量PCR分析AcCHS和AcLDOX在‘红阳’（红肉）、‘金魁’（绿肉）和‘金农’（黄肉）3种不同果肉颜色的猕猴桃内果皮中的表达，发现AcCHS的表达量在‘红阳’果实转色期（花后65 d）较高，而在‘金农’开花后表达量呈持续下降趋势；AcLDOX在‘红阳’果实发育早期呈上升趋势，花后65 d后迅速下降，在‘金魁’果实发育后期呈明显上升趋势，在‘金农’开花后呈持续下降趋势。