转天山雪莲冷调节蛋白基因烟草的获得及其抗寒性鉴定

• 作者: 喻娜 王恒良 王爱英 王重 祝建波 程晨 郭新勇
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 天山雪莲 siCOR基因 烟草 抗寒性
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-10
• 分类号: Q789
• 字数: 5901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4025.2012.01.001

摘要

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF)；构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析.结果表明:(1)siCOR大小661 bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04％).(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快；在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻.研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征.