诱导新生小鼠对Graves病免疫耐受的研究

• 作者: 伍丽萍 张煜 徐利 施秉银 旬利茹 杨靖 田竹芳 高珊
• 来源期刊: 中华内分泌代谢杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 格雷夫斯病 动物模型 小鼠 免疫耐受
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 744-749
• 分类号: R581.1
• 字数: 5252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6699.2012.09.013

摘要

目的 研究TSH受体(TSHR)289基因诱导Graves病新生免疫耐受的可行性,并初步探索其可能机制.方法 将出生0～24hBALB/c雌性小鼠分为腹腔注射组、肌肉注射组、造模组及正常对照组,腹腔注射组或肌肉注射组分别设低剂量、中剂量、高剂量耐受组及相应对照组,将腹腔注射、肌肉注射不同剂量耐受组及各自对照组给予1×106particles(低)、1×108particles(中)、1×1010particles(高)的Ad-TSHR289或Ad-lacz进行预处理6～7周后,除正常对照组肌肉注射Ad-lacz外,其余各组小鼠均给予Ad-TSHR289免疫,每3周1次,共3次,首次免疫后10d检测血清促甲状腺素受体抗体(TRAb),末次免疫后4周测血清TRAb、TT4、脾CD4+CD25+Foxp3/CD4+比例,并行甲状腺组织学检查.结果 首次注射后10d,腹腔注射及肌肉注射高剂量耐受组均未诱导出针对TSHR的抗体反应,而对照组TRAb滴度明显升高(P＜0.05).末次免疫后4周,腹腔及肌肉注射高剂量耐受组均只有1/10小鼠出现阳性的抗体反应,腹腔注射高剂量耐受组没有小鼠发生甲状腺功能亢进,而肌肉注射高剂耐受量组2/10小鼠出现轻微的TT4升高,其相应对照组却出现了强烈的抗体反应(P＜0.01),TT4水平明显升高(P＜0.05),所有TT4升高的小鼠均出现了甲状腺组织增生性改变.此外,腹腔注射及肌肉注射高剂量耐受组CD4+CD25+Foxp3/CD4+比例与对照组比较明显增高(P＜0.01)腹腔注射及肌肉注射其余组群,与其对照组和造模组比较Graves病发生率差异无统计学意义.结论 TSHR 289基因可以通过腺病毒为载体,腹腔和肌肉注射两种途径诱导新生小鼠成年后对Graves病免疫耐受,抑制Graves病的发生.而高剂量的抗原刺激容易导致耐受产生.CD4+CD25+Foxp3+T细胞在免疫耐受的诱导和维持中可能起重要作用.