芥菜AP1基因体外表达及其与FLC相互作用的验证

• 作者: 宋明 汤青林 王志敏 许俊强
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 芥菜 AP1基因 FLC 蛋白互作
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1328-1333
• 分类号: Q75
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.01328

摘要

芥菜花分生组织决定因子AP1与开花路径核心调节子FLC可能存在直接的相互作用,从而调节开花时间.为进一步检测该相互作用,从芥菜“QJ”材料中同源克隆了790 bp的AP1 eDNA序列,该基因编码256个氨基酸.生物信息学分析表明,AP1属MIKC型蛋白,其MADS域含有2个α 螺旋和2个β折叠,第1个0螺旋内含有1个不保守氨基酸位点；而K域含有3个α螺旋,第1、2个0 螺旋内各有1个不保守位点,第3个α螺旋内具有4个不保守位点.同时构建了原核表达质粒pET43.1a-AP1,转化宿主菌大肠杆菌BL21,以IPTG诱导该融合蛋白体外表达.利用pET43.1 a-APl融合蛋白序列中6×His标签与Ni+结合的特点,结合SDS-PAGE分析,证实了体外表达蛋白AP1能与FLC相互作用并形成复合体,该结果为深入研究AP1与FLC互作机制及花分生组织的分子调控奠定了基础.