bFGF培养体系中添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响

• 作者: 周川 张秀华 林嘉鹏 汪立芹 石庆华 赵云程 黄俊成
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊类胚胎干细胞 多能性调控因子 体外培养 候选基因
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 797-803
• 分类号: S826.3
• 字数: 4201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.04.021

摘要

为筛选出能够维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like)多能性的因子,以oESC-like为材料,在N2B27/CH/bFGF培养体系中,分别加入PD、PD/hLIF、PD/BPM4、PD/hLIF/BMP4,培养细胞8d,分析绵羊类胚胎干细胞多能性,确定最适培养体系.结果显示:在N2B27/CH/bFGF培养体系添加PD或PD/hLIF后,oESC-like细胞生长较好；所有培养液中oESC-like细胞的AKP染色及多能性候选基因Sox2和Oct4免疫荧光蛋白染色结果均呈阳性；添加PD后,多能性候选基因Oct4与Klf4 mRNA的表达量显著高于N2B27/CH/bFGF培养体系中的(P＜0.01),Nestin与Lin28的表达量显著降低(P＜0.Ol),Sox2与c-Myc升高但差异不显著.添加PD/hLIF后,Oct4的表达量显著高于N2B27/CH/bFGF培养体系中的(P＜0.01),c-Myc、Klf4、Lin28表达量升高但不显著,Nestin和Sox2表达量降低但也不显著.以上结果表明:在oESC-like培养体系中,添加PD或PD/hLIF可能有利于维持绵羊类胚胎干细胞的多能性.