人参多糖对K562细胞凋亡与细胞周期的影响及其机制

• 作者: 何轩 刘艺 姜蓉 左国伟 李静 王建伟 赵亮 陈地龙 魏强
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人参多糖 K562细胞 周期阻滞 ERK NF-κB Cyclin D1
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1181-1184
• 分类号: R285.5|R730.23|R733.7
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)诱导白血病细胞K562凋亡和周期阻滞的机制.方法 取对数生长期的K562细胞,调整密度为7×108/L,空白对照组予以常规培养；GPS组加入400 mg/L GPS.流式细胞仪测定细胞的凋亡率及细胞周期分布变化；RT-PCR检测细胞ERK表达的变化.免疫组化的方法检测细胞中p-ERK、NF-κB、Cyclin D1蛋白定位及表达量的变化.Western blot检测细胞中ERK、p-ERK、NF-κB、Cyclin D1蛋白的变化.结果 与对照组比较,K562细胞在400mg/L GPS的作用下,体外培养24、48、72 h后,GPS组细胞凋亡率显著增高(P＜0.05),周期分布检测结果显示,与对照组相比,GPS组K562细胞G0/G1期细胞数量呈时间依赖性增多(P＜0.05),G2+M、S期细胞数量则明显减少(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,400 mg/L GPS处理48 h组ERK mRNA的表达水平明显低于对照组(0.20vs0.50,P＜0.05).免疫组化显示p-ERK、NF-κB、Cyclin D1主要分布在细胞核和细胞质,与对照组相比,GPS组K562细胞内p-ERK、NF-κB、Cyclin D1的表达明显减弱.Western blot检测结果显示,ERK总蛋白无明显变化(P＞0.05),而p-ERK、NF-κB、Cyclin D1随时间变化有减少趋势,且在48h减少明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 人参多糖GPS可促使K562细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导K562细胞凋亡,且均呈时间依赖性.GPS促进K562细胞凋亡、导致其细胞周期阻滞的机制可能是通过抑制ERK/NF-κB信号通路的激活,进而下调Cyclin D1来实现的.