维甲酸联合音猬因子诱导人脐带间充质干细胞分化为运动神经元

• 作者: 刘学元 单伟 姜东 房艳 李德华
• 来源期刊: 解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐带间充质干细胞 运动神经元 维甲酸 音猬因子 诱导
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 149-153
• 分类号: R322
• 字数: 4283字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1633.2012.02.006

摘要

目的:探讨单独和联合应用维甲酸(RA)与音猬因子(Shh)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向运动神经元分化的影响,为其进一步临床应用提供理论基础.方法:用双酶消化法提取纯化hUCMSCs,取传至第3代的hUCMSCs,检测表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44的表达情况.根据培养液中加入不同诱导剂分为空白对照组,RA组(0.5μg/ml RA),Shh组(300 ng/ml Shh),RA+Shh组(0.5μg/ml RA和300 ng/ml Shh).诱导细胞培养后第25天,观察细胞形态的变化；采用免疫细胞化学检测Nestin、MAP-2、Hb9和GFAP的表达,比较各组阳性率.用免疫印迹检测RA+Shh组诱导后第5、10、15、20、25天Nestin、MAP-2、Hb9的表达情况.结果:流式细胞仪检测结果显示,CD29、CD44高表达,CD31、CD34阴性.空白对照组和Shh组细胞诱导后形态变化不明显,Nestin和MAP-2阳性表达率均很低,两者之间无差别.RA组和RA+Shh组细胞诱导第25天后,细胞胞质以胞核为中心收缩,部分胞质收缩形成细胞的突起,突起之间有网状连接,具有典型的神经元样形态；Nestin和MAP-2的阳性表达率比其他2组增多.4组中只有RA+Shh组细胞诱导后Hb9表达阳性,阳性率为33.62％,其他各组均无Hb9表达.各组GFAP表达阳性率均较低,无差异.免疫印迹检测结果显示,RA+Shh组细胞从第5天起,可见Nestin的表达；第10天少量的MAP-2表达；第15天Hb9开始出现；第20天Nestin下降；第25天MAP-2和Hb9达到本次检测的高峰.结论:RA能促进hUCMSCs向神经元分化,单独使用Shh并没有明显效果,而RA联合Shh能促进hUCMSCs向运动神经元分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单伟	辽宁医学院解剖学教研室	52	160	6.0	9.0
2	李德华	辽宁医学院解剖学教研室	59	244	9.0	13.0
3	刘学元	辽宁医学院解剖学教研室	8	17	2.0	3.0
4	房艳	辽宁医学院解剖学教研室	20	79	5.0	8.0
5	姜东	辽宁医学院解剖学教研室	19	44	4.0	5.0