组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)抑制剂分子水平高通量筛选模型的建立

• 作者: 周宇波 张玥 苏明波
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: HDAC6 昆虫表达系统 小分子抑制剂 高通量筛选
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 181-188
• 分类号: Q786
• 字数: 7126字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立分子水平HDAC6小分子抑制剂的高通量筛选模型,用于新型HDAC6特异性小分子抑制剂的发现.建立HDAC6的昆虫表达系统,分离纯化HDAC6蛋白,利用底物Boc-Lys( Ac) -AMC对纯化的HDAC6进行测活,并对测活体系进行优化,以SAHA为阳性抑制剂,确定适合高通量筛选的酶及底物浓度,反应时间等.首先构建HDAC6昆虫真核细胞表达载体,转入昆虫细胞中表达,并利用GST亲和柱纯化获得较高纯度的GST-HDAC6融合蛋白;建立体外HDAC6分子测活方法,表明昆虫表达的GST-HDAC6融合蛋白具有去乙酰化酶活性,并通过对多种参数优化使得Z'因子达到0.60,表明分子水平的HDAC6小分子抑制剂高通量筛选体系成功建立.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玥	华东师范大学生命科学学院	4	6	2.0	2.0
2	苏明波	华东师范大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
6	周宇波	上海药物研究所国家新药筛选中心	1	3	1.0	1.0