卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3侧群细胞的生物学特性分析

• 作者: 曹冬焱 曾建芳 杨佳欣 梁兵 沈铿 赵喆 骆黎静
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 侧群细胞 细胞系,肿瘤 肿瘤干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 281-285
• 分类号: R246.3
• 字数: 5302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2012.04.009

摘要

目的 检测和分选人卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系OVCAR-3中的侧群(SP)细胞,鉴定其是否具有肿瘤干细胞的生物学特性.方法 OVCAR-3细胞经DNA染料Hoechst 33342染色后,采用流式细胞仪检测和分选低染(即SP细胞)和高染[即非侧群(NSP)细胞]的两群细胞.通过裸鼠体内的有限稀释成瘤试验对比SP和NSP细胞的成瘤能力[以成瘤比率(成瘤的裸鼠数/接种的裸鼠数)和成瘤时间表示]、自我更新和分化能力.实时PCR技术检测SP和NSP细胞中干性基因(Oct4、Klf4、Nanog基因)和三磷酸腺苷结合盒(ABC)转运蛋白家族重要分子——ABCG2、ABCB1、ABCC2基因的表达.药敏试验检测SP和NSP细胞对4种化疗药物(顺铂、紫杉醇、多柔比星、米托蒽醌)的敏感性.结果 OVCAR-3细胞系中可检测到少量的SP细胞,其比例为(1.13±0.39)％.102个SP细胞即可在裸鼠体内成瘤,成瘤比率为2/5,成瘤时间为52～61 d；而至少104个NSP细胞才能成瘤,成瘤比率为2/5,成瘤时间为64 ～ 98 d.SP细胞的成瘤性至少为NSP细胞的100倍.103个SP细胞接种裸鼠后所形成的瘤组织中SP细胞的比例为(2.09±0.73)％,与分选前的比例相似.SP细胞中干性基因Oct-4和Klf4及ABCG2和ABCC2基因的表达量分别是NSP细胞的(1.95±0.41)、(4.26±0.63)、(3.22 ±0.36)和(1.76±0.26)倍,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).在0.25 μg/ml顺铂、0.01 μmol/L紫杉醇、0.25 μmol/L多柔比星和0.05 μg/ml米托蒽醌分别作用下,SP和NSP细胞的相对活性分别为0.757±0.105、0.474±0.035,0.521±0.092、0.384±0.073,0.742±0.051、0.526 ±0.088,0.690±0.096、0.466 ±0.112；相同药物浓度下,SP细胞的相对活性显著高于NSP细胞(P均＜0.05).结论 卵巢癌细胞系OVCAR-3来源的SP细胞与NSP细胞相比,具有显著增强的体内成瘤能力、自我更新和分化能力、高表达干性基因和ABC转运蛋白家族基因以及多药耐药等肿瘤干细胞样细胞的生物学特性.SP表型可考虑作为分选卵巢癌干细胞样细胞的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈铿	中国医学科学院北京协和医学院	100	1431	16.0	36.0