花生蔗糖合酶基因AhSuSy的克隆和干旱胁迫表达分析

• 作者: 何美敬 侯名语 刘立峰 崔顺立 穆国俊 陈焕英
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 花生 蔗糖合酶基因 克隆 半定量RT-PCR 表达分析
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 2139-2146
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.02139

摘要

蔗糖合酶(sucrose synthase,SuSy)是蔗糖代谢途径中的关键酶,在植物生长、发育和渗透调节过程中起着重要的作用.本研究利用同源克隆、RACE和TAIL-PCR相结合的方法从花生叶片中分离了蔗糖合酶基因,命名为AhSuSy (GenBank登录号为JF346233).该基因cDNA序列全长2 790 bp,包含一个2 421 bp的开放阅读框(ORF),5’端非编码区57 bp,3’端非编码区为312 bp.根据编码区预测AhSuSy编码806个氨基酸,与大豆、拟南芥、玉米等植物中相关蛋白的氨基酸序列同源性达75％以上；成功构建了该基因的原核表达载体pET32a-AhSuSy,在IPTG诱导下得到92 kD左右的蛋白,与理论值一致.半定量RT-PCR分析表明AhSuSy在花生根、茎、叶中均有表达.利用10％PEG模拟干旱处理花生幼苗,分析胁迫后AhSuSy的转录水平,同时测定蔗糖合酶活性和蔗糖含量,发现三者均表现为处理后4～12 h逐渐升高,相关性分析显示花生中蔗糖含量与蔗糖合酶活性的相关系数达0.993 (P=0.007＜0.01),处理后12～24 h逐渐降低.推测该基因响应干旱调控,在花生抗旱胁迫中可能起着一定的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔顺立	河北农业大学农学院/河北省作物种质资源重点实验室	5	27	3.0	5.0