1株猪源牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

• 作者: 孙春清 张宏彪 张荣 文心田 曹三杰 蔺涛 袁世山 邓宇 郑浩 黄律 龙进学
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 进化分析 分离鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 416-423
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 1839字
• 语种: 中文

摘要

从BVDV阳性仔猪病料中分离病毒,为开展猪源BVDV病原学研究奠定基础.将处理后BVDV阳性仔猪组织样品接种MDBK细胞,分离到1株猪源BVDV,命名为SD0803株.通过细胞培养、直接免疫荧光、5’-UTR与Npro PCR扩增、电镜观察、TCID50测定及对其分子进化特征加以分析.结果表明,该毒株在MDBK细胞上盲传至13代未出现细胞病变.在直接免疫荧光试验中呈阳性荧光信号.PCR扩增分别获得5’-UTR与Npro预期大小DNA片段.电镜观察,病毒粒子略呈圆形,有囊膜,直径约50 nm.病毒滴度为10-6.5 TCID50·0.2 mL-1.SD0803 5’-UTR、Npro序列进化分析显示,该分离株属于BVDV-1,与已知BVDV-1各亚型之间同源性较低,单独成一分支.结果表明,成功分离鉴定1株猪源BVDV SD0803,该毒株为非致病变型BVDV-1,极有可能为BVDV-1新的亚型.