siRNA干扰ADAMTS2基因对肝星状细胞的影响

• 作者: 周鸿 徐庆 施志强 罗蒙 陈炜
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 解聚蛋白样金属蛋白酶2 Ⅰ型血小板结合蛋白基序 肝纤维化 肝星状细胞 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 205-210
• 分类号: R575
• 字数: 5363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2012.03.014

摘要

目的 探讨siRNA干扰大鼠含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶2(ADAMTS2)基因后对大鼠肝星状细胞(HSC)生物学特性的影响及其机制,评估ADAMTS2基因作为一种新的靶向基因在抗肝纤维化治疗中的应用前景.方法 设计并化学合成3对针对大鼠ADAMTS2 mRNA 2237、2597及690位点的siRNAs.用筛选出的抑制效率最高的siRNA体外转染HSC-T6,应用实时PCR、Westem blot及MTT等方法研究沉默ADAMTS2基因对大鼠HSC活化、增殖等生物学特性及对基因ADAMTS2、α-SMA、COL1α1、COL(I)、TGF-β1、MMP-2和TIMP-3表达的影响.结果 在相同注射剂量(50 nmol/L)及时间(48 h)下,2237位点的siRNA-ADAMTS2具有最高的抑制效率；能显著抑制ADAMTS2基因mRNA和蛋白表达(抑制率80％以上)；显著抑制COL(I)、α-SMA和TGF-β1在HSC中的表达.HSC的增殖能力显著降低.结论 化学合成的siRNA-ADAMTS2干扰载体能有效抑制ADAMTS2基因在大鼠HSC-T6细胞系中的表达,抑制HSC的活化和增殖,同时显著降低COL(I)、α-SMA和TGF-β1的表达,具有潜在的阻止甚至逆转肝纤维化的作用.ADAMTS2可能是抗肝纤维化治疗的有效靶位,抑制ADAMTS2在肝脏的表达可能是一种有效的抗肝纤维化治疗策略.