超声微泡介导MCD-microRNA干扰质粒对大鼠心肌梗死后心功能的影响

• 作者: 刘地川 吴泓权 童欣 蔡敏 黄晶
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌梗死 微RNAs RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 400-404
• 分类号: R541.4
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨通过超声微泡介导丙二酰辅酶A脱羧酶(MCD)-microRNA干扰质粒靶向抑制心肌MCD对心肌梗死大鼠心功能的影响及其可能机制.方法 将MCD表达质粒与4条待筛选的MCD-microRNA干扰质粒分别共转染至HEK293细胞中,通过实时荧光定量PCR检测MCD mRNA表达水平,筛选出抑制率最高的干扰序列进行动物实验.通过结扎大鼠左冠状动脉前降支构建心肌梗死模型,将28只心肌梗死大鼠随机分为心肌梗死+生理盐水组及3个心肌梗死干预组(心肌梗死+质粒组,心肌梗死+超声+质粒组,心肌梗死+超声+微泡+质粒组),每组7只；另取7只大鼠(假手术+生理盐水)作为假手术组.将筛选出的MCD-microRNA干扰质粒与脂质微泡混合,通过超声介导转染人心肌梗死后4周的大鼠中,每4d转染1次,连续转染28d后,通过超声心动图观察左室射血分数(LVEF)、短轴缩短分数(FS)和左室舒张末期内径(LVIDd)的变化,采用高效液相色谱法测量丙二酰辅酶A的含量,酶联免疫法检测心肌乳酸的变化.结果 根据实时荧光定量PCR结果选择出1条对MCD mRNA表达抑制率最高的干扰质粒,其转染抑制率约为82％.在动物实验中,心肌梗死+超声+微泡+质粒组的LVEF、FS均高于其他心肌梗死干预组(P＜0.05),但明显低于假手术组(P＜0.05)；乳酸含量明显低于其他心肌梗死干预组(P＜0.05),但高于假手术组(P＜0.05)；丙二酰辅酶A含量明显高于其他各组(P＜0.05)；LVIDd在各心肌梗死干预组之间无显著差异(P＞0.05),但明显低于假手术组(P＜0.05).结论 超声微泡介导MCD-microRNA干扰质粒靶向转染人梗死后心肌,可增加丙二酰辅酶A含量,降低乳酸含量,虽不能抑制心室扩张,但可明显延缓心功能的恶化.