南方水稻黑条矮缩病毒SP7-1植物表达载体的构建及遗传转化

• 作者: 卢嫣红 周彤 周益军 孙枫 苑侠 范永坚
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 南方水稻黑条矮缩病毒 SP7-1基因 拟南芥 转化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1278-1282
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3526字
• 语种: 中文

摘要

克隆南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的SP7-1基因,构建植物表达载体并转化拟南芥,为研究SP7-1致病机理提供基础.根据已发表的SRBSDV SP7-1序列,设计特异性引物,通过RT-PCR的方法从感病水稻植株中克隆到完整的SP7-1基因.通过酶切连接,构建了SP7-1植物表达载体pCHF3/SP7-1,通过农杆菌介导的花序浸润法转化野生型拟南芥,获得转化植株T0代种子.对收获的T0代种子进行卡那霉素筛选,获得了4株阳性植株.阳性植株的PCR和RT-PCR分析检测结果表明,构建的SP7-1载体已成功转化拟南芥,病毒SP7-1已经整合至拟南芥基因组中并能正常表达.